兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1ELISA試劑盒試劑配制
1、 標(biāo)準(zhǔn)品
(1) 從試劑盒中取出一支標(biāo)準(zhǔn)品,于6000-10000rpm 離心30 秒。用1ml 樣本稀釋液溶解,并用吸頭對準(zhǔn)凍存管底部反復(fù)吸打5 次以助溶解,充分混勻得到標(biāo)準(zhǔn)品S7,放置備用。
(2) 取7 個1.5 ml 離心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl 樣本稀釋液。吸取250μl 標(biāo)準(zhǔn)品S7 到*個離心管中(S6),輕輕吹打混勻。從S6 中吸取250μl 到第二個EP 管中(S5),輕輕吹打混勻。以此類推進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的倍比稀釋。S0 為樣本稀釋液。
2、 洗液工作液濃洗滌液按1:25倍用去離子水進(jìn)行稀釋。例如用量筒量取240ml去離子水,倒入燒杯或其他潔凈容器中,再量取10ml濃洗滌液,均勻加入,攪拌混勻,在臨用前配妥。濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3、 標(biāo)記抗體工作液標(biāo)記抗體液按1:100倍用標(biāo)記抗體稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl標(biāo)記抗體加990μl標(biāo)記抗體稀釋液,輕輕混勻,在臨用10分鐘內(nèi)配妥。
4、 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素按1:100倍用辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液,輕輕混勻,在臨用10分鐘內(nèi)配妥。
試劑盒性能
1. 靈敏度:*小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
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