大鼠C肽elisa試劑盒溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量,預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。
試劑盒計(jì)算方法:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度,用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,即為樣品的實(shí)際濃度。
一、具備以下優(yōu)勢(shì):
1、優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)。
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高。
3、*抗體----高效、靈敏、特異。
4、技術(shù)規(guī)范,高效。
5、適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、體液、組織勻漿液、等多種類(lèi)型的樣本。
6、可檢測(cè)動(dòng)物類(lèi)型豐富:兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、雞、蝦、河蟹、鱸魚(yú)、斑馬魚(yú)等。
7、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子等等。
二、操作步驟:
1.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
2.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
3.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
4.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
5、 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
三、大鼠C肽elisa試劑盒操作注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2、加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3、孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4、反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5、建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。