1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作注意事項
1、進口elisa試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。
2、實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3、預處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。
4、嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5、所有液體組分使用前充分搖勻。
保溫方式
1、可將ELISA試板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度迅速平衡。
2、為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。
3、若用保溫箱，應放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，后將ELISA板放在濕紗布上。
4、應先放在保溫箱中預溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應如此。
5、無論是水浴還是濕盒溫育，反應板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。
6、室溫溫育的反應，操作時的室溫應嚴格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標準室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。
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