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簡要描述:化膿放線菌PCR檢測試劑盒廠家上海帛科生物相關產(chǎn)品:異綠原酸C;Isochlorogenic CAS 32451-88-0 * 規(guī)格: 20mg葉酸;Folic acid CAS 59-30-3 * 規(guī)格: 20mg貝母堿苷;Sipeimine-3β-D CAS * 規(guī)格: 10mg五味子酚;Schisanhel CAS 69363-14-0 * 規(guī)格
詳細介紹
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
化膿放線菌PCR檢測試劑盒廠家 | Actinomyces pyogenesPCR | BK-P8761 |
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
紅 標準品無效期 CAS * 規(guī)格: 200mg
棕櫚酸甲酯;Methyl hexadec CAS 112-39-0 * 規(guī)格: 25mg
紫菀;shione CAS 10376-48-4 * 規(guī)格: 20mg
乙氧基血根堿;Ethoxysanguin CAS 28342-31-6 * 規(guī)格: 20mg
石蒜堿;Lycorine hydro CAS 2188-68-3 * 規(guī)格: 20mg
異綠原酸C;Isochlorogenic CAS 32451-88-0 * 規(guī)格: 20mg
葉酸;Folic acid CAS 59-30-3 * 規(guī)格: 20mg
貝母堿苷;Sipeimine-3β-D CAS * 規(guī)格: 10mg
五味子酚;Schisanhel CAS 69363-14-0 * 規(guī)格: 20mg
11-羰基-Β-乙酰乳香酸;Acetyl CAS 67416-61-9 * 規(guī)格: 20mg
四氫非洲防己堿;Tetrahydroco CAS 483-34-1 * 規(guī)格: 20mg
甘草堿;Tabersonine CAS 4429-63-4 * 規(guī)格: 20mg
飛薊賓;Silibinin CAS 22888-70-6 * 規(guī)格: 20mg
人參皂苷F2;Ginseside F CAS 62025-49-4 * 規(guī)格: 20mg
去亞小檗堿;Demethyleneb CAS 25459-91-0 * 規(guī)格: 20mg
化膿放線菌PCR檢測試劑盒廠家彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)AM(人腺樣囊性細胞(高轉移))
泡盛曲霉 Aspergillus awamori釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
百脈根根瘤菌 Rhizobium loti黃綠綠僵菌 Metarhizium flavoviride
One StepWestern Kit AP(Mouse)/一步法快速WB(AP)試劑盒(鼠)人肺腺細胞(胸膜滲出液)
植物桿菌 Lactobacillus plantarumHGC-27人胃細胞
光帽鱗傘 Pholiota nameko鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
人牙周膜成纖維細胞*培養(yǎng)基蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
人臍靜脈平滑肌細胞RTE(大鼠氣管上皮細胞)
異常漢遜酵母 Hansenula anomala嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacterium infantis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小單孢菌 Micromonospora sp.
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株)骨瘤
皺褶假絲酵母 Candida rugosa人臍動脈內皮細胞
金色鏈霉菌 Streptomyces aureus凝結芽孢桿菌 Bacillus coagulans
EB-3(人Burkitt淋巴瘤細胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
泡盛曲霉 Aspergillus awamoriHB611(人肝細胞)
金色產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces aureochromogenes植物桿菌 Lactobacillus plantarum
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