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簡要描述:藍舌病病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格上海帛科生物相關產(chǎn)品:-氯-2-硝吡 158.54 3- -2- nitro pyridine*:54231-32-2分子量: C5H3ClN2O22-并咪唑 194.23 2- of 2-Phenylbenzimidazole*:716-79-0分子量: C13H10N2叔丁二甲哇烷咪唑 182.34 Tert butyl two
詳細介紹
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
藍舌病病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格 | Bluetongue Virus(BTV)RTPCR | BK-P8883 |
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
椿皮 CAS * 規(guī)格: 2g
人工牛黃 CAS * 規(guī)格: 50mg
交聯(lián)聚維 CAS * 規(guī)格: 100mg
正常人血免疫球蛋白國家標準品 CAS * 規(guī)格: 87 IU/支
CAS * 規(guī)格: 100mg
紫蘇子 CAS * 規(guī)格: 1g
益智 CAS * 規(guī)格: 1g
C-肽(C-P) CAS * 規(guī)格: 3支/套,0.5ml/支
五味子酯甲 CAS 58546-56-8 * 規(guī)格: 20mg
羅星 CAS 79660-72-3 * 規(guī)格: 100mg
薯蕷皂苷 CAS * 規(guī)格: 20mg
鷓鴣菜 CAS * 規(guī)格: 1g
頭孢吡肟 CAS 88040-23-7 * 規(guī)格: 100mg
木鱉子 CAS * 規(guī)格: 0.5g
去氧尿苷 CAS 436349 * 規(guī)格: 100mg
藍舌病病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格赫斯特熒光燃料,33342 Hearst fluorescent fuel, 33342 561.93分子量: C27H28N6O·3HCl·xH2O*:23491-52-3
異戊 ISO e 70.13分子量: C5H10*:513-35-9
2-羥并噻唑 151.19 2羥并噻唑*:934-34-9分子量: C7H5NOS
3-噻吩三氟硼酸鉀 190.04 3- three kbf4 thiophene*:192863-37-9分子量: C4H3BF3S.K
1,3-二甲-6-脲嘧 155.15 1,3- two methyl -6-*:6642-31-5分子量: C6H9N3O2
3-氯-2-硝吡 158.54 3- -2- nitro pyridine*:54231-32-2分子量: C5H3ClN2O2
2-并咪唑 194.23 2- of 2-Phenylbenzimidazole*:716-79-0分子量: C13H10N2
叔丁二甲哇烷咪唑 182.34 Tert butyl two methyl group*:54925-64-3分子量: C9H18N2Si
性紅88 Acid red 88 400.38分子量: C20H13N2NaO4S*:1658-56-6
2-氯并噻唑 169.63 2- - benzothiazole*:615-20-3分子量: C7H4ClNS
1,4-雙[4-(二對甲)乙] 672.92 1,4- bis [4- (two to toluene amino) styrene*:55035-43-3分子量: C50H44N2
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