技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

3.5% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口

NCI-H524(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion

費氏中華瘤菌 Sinorhizobium fredii馬杜拉放線菌 Actinomadura sp.

泡盛曲霉 Aspergillus awamori枝孢霉 Cladosporium sp.

無翅型MMTV整合位點家族成員1(WNT1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 1 (WNT1)

苜蓿中華瘤菌 Sinorhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人惡性色素瘤細胞英文名稱：A375

小鼠結(jié)腸細胞芽孢桿菌屬 Bacillus sp.

 人肺細胞株英文名稱：MSTO-211H

Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格：50次

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1)

念珠菌通用PCR檢測試劑盒規(guī)格人非小細胞肺腺細胞SCaBER(人膀胱鱗細胞)

葡枝根霉 Rhizopus stolonifer桿菌屬 Lactobacillus sp.

貝葉多孔菌根瘤菌

丹參酮IIAU-2 OS, 人骨瘤細胞

大鼠腸上皮細胞*培養(yǎng)基日本根霉 Rhizopus japonicus

異常漢遜酵母 Hansenula anomala磚紅鐮孢

涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis畢赤酵母 Pichia sp.

NCI-H838(人非小細胞肺細胞)Hep 3B(人肝細胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum酸球菌 Lactococcus lactis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti苜蓿中華根瘤菌

Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細胞)SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞)

水螺菌 Aquaspirillum sp.戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

少根根霉 Rhizopus arrhizus毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

人角膜上皮細胞*培養(yǎng)基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae293(人胚腎細胞)

海水產(chǎn)堿菌泡盛曲霉 Aspergillus awamori