原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomalaSF9, 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞

人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞藍(lán)色預(yù)染高分子量蛋白Marker

大鼠胰島素細(xì)胞英文名稱：INS-1

δ-促睡眠肽(δSIP)重組蛋白英文名稱：Recombinant Delta-Sleep Inducing Peptide (dSIP)

HA(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤

PC-3M-IE8(人前列腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia異型德克酵母 Dekkera anomala

人小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

刺激隱核蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti黑曲霉 Aspergillus niger

人羊膜細(xì)胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

人臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基PANC-1(人胰腺細(xì)胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae桿菌屬 Lactobacillus sp.

涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli

Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)THP-1人單核白血病細(xì)胞

植物桿菌 Lactobacillus plantarum酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti猴菌

NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞)枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilusFaDu(人咽鱗細(xì)胞)

大豆慢生根瘤菌酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

人結(jié)腸細(xì)胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeRSC96(大鼠雪旺細(xì)胞)

鬼傘屬 Bradyrhizobium vigna宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki雙孢蘑菇