簡要描述:紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關產品:猴菌嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus現(xiàn)隱肉湯/Presence Absence Broth水中大腸菌群計數250克國產/進口鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)
詳細介紹
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒說明書 | Erysipelothrix rhusiopathiaePCR | BK-P9148 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
胰高血糖素(GC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Glucagon (GC)
角蛋白7(KRT7)重組蛋白英文名稱:Recombinant Keratin 7 (KRT7)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae立枯絲核菌 Rhizoctonia solani
AllIP/Co-IP Kit(Rabbit/Human/Rat)通用型免疫沉淀試劑盒(兔/人/大鼠)50次試劑盒
神經束蛋白(NFASC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neurofascin (NFASC)
牛奶蛋白胨/蛋白胨C/Peptonized milkBR100/500克國產/進口
考馬斯亮藍G-250人少突膠質細胞
EC109,人食管細胞 Human
猴菌嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
現(xiàn)隱肉湯/Presence Absence Broth水中大腸菌群計數250克國產/進口
鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)
紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒說明書戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus人視網膜muller細胞*培養(yǎng)基
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipesMCF-7 [MCF7], 人腺細胞系
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum屎腸球菌 Enterococcus faecium
透質酸酶(含10mL酶解緩沖液)香菇 Lentinula edodes
泡盛曲霉 Aspergillus awamoriCitrate Buffer(100x)/檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復液, 100x)
百脈根根瘤菌 Rhizobium loti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
OP9(小鼠骨髓基質細胞)鏈霉菌 Streptomyces sp.
植物桿菌 Lactobacillus plantarum人膀胱平滑肌細胞*培養(yǎng)基
雙孢蘑菇rCSC, 大鼠心肌細胞
小鼠巨噬細胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基鏈霉菌 Streptomyces sp.
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeAmmonium Persulfate(APS)
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質細胞)黃綠綠僵菌 Metarhizium flavoviride
炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius人肝氟尿嘧啶耐藥株
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiU251人膠質瘤細胞
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