當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > PCR試劑盒 > PCR檢測試劑盒 > 50次馬虻PCR檢測試劑盒價(jià)格
簡要描述:馬虻PCR檢測試劑盒價(jià)格上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:大鼠腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL孟加拉紅培養(yǎng)基(虎紅瓊脂) 規(guī)格: 250g 用途: 供霉菌和酵母的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 用途: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的
詳細(xì)介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬虻PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Gasterophilus spp.PCR | BK-P9202 |
?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
HAN(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:COLO320/DM
卵磷脂(蛋黃)/蛋黃軟磷脂/磷脂酰膽堿/蛋黃卵磷脂/磷脂蛋黃素/Lecithin from egg yolkBR10克國產(chǎn)/進(jìn)口
RF/6A(猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基小鼠胰島細(xì)胞*培養(yǎng)基
纖連蛋白(FN)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fibronectin (FN)
中慢生華癸瘤菌 Mesorhizobium huakuii橢圓釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus
鳥氨酸脫羧酶肉湯發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
賴氨酸脫羧酶肉湯發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
白介素1受體拮抗劑(IL1RA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA)
霉=匍枝霉CaEs-17, 人食管細(xì)胞株
馬虻PCR檢測試劑盒價(jià)格亞硫酸鹽瓊脂/Sulfite Agar厭氧亞硫酸鹽還原桿菌試管計(jì)數(shù)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
明膠蛋白胨/蛋白胨E/Gelatin PeptoneBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口
蛋黃粉/Egg yolk powderBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口
Hoagland Nitrogen-free MediumBR20升國產(chǎn)/進(jìn)口
人輸尿管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
孟加拉紅培養(yǎng)基(虎紅瓊脂) 規(guī)格: 250g 用途: 供霉菌和酵母的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 用途: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10-...
Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白 Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)
凋亡相關(guān)因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
接觸蛋白2(CNTN2)重組蛋白 Recombinant Contactin 2 (CNTN2)
肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白 Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)
足突蛋白(PDCN)重組蛋白 Recombinant Podocin (PDCN)
NCI-N87(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Hep B1.2(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人膀胱細(xì)胞 EJ
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系我們
上海帛科生物技術(shù)有限公司 公司地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661 號24棟 技術(shù)支持:環(huán)保在線掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網(wǎng)站二維碼