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簡要描述:杜克雷嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:玫瑰小雙孢菌 Microbispora rosea金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliaeLoVo(人大腸細(xì)胞)蘇云金芽胞桿菌云南亞種 Bacillus thuringiensis subsp. yunnanensis人白血病阿霉素耐藥株皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum
詳細(xì)介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
杜克雷嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Haemophilus ducreyiPCR | BK-P9226 |
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
人參皂苷Rh1 CAS 63223-86-9 * 規(guī)格: 20mg
5-羥 CAS 67-47-0 * 規(guī)格: 20mg
白綿馬素AA CAS 3570-40-9 * 規(guī)格: 10mg
輪環(huán)藤堿 CAS 294-90-6 * 規(guī)格: 20mg
奎寧 CAS 130-95-0 * 規(guī)格: 20mg
羥基積雪草酸 CAS 18449-41-7 * 規(guī)格: 20mg
黃芩素 CAS 491-67-8 * 規(guī)格: 20mg
鬼臼素-4-O-葡萄糖苷 CAS 16481-54-2訂購| 規(guī)格: 10mg
異槲皮苷 CAS 21637-25-2 * 規(guī)格: 20mg
蒜氨酸 CAS 556-27-4 * 規(guī)格: 20mg
丁香酸 CAS 530-57-4 * 規(guī)格: 20mg
草質(zhì)素 CAS 527-95-7 * 規(guī)格: 10mg
羊藿苷 CAS 4 * 規(guī)格: 20mg
黃連堿 CAS 6020-18-4 * 規(guī)格: 20mg
芍藥苷 CAS 23180-57-6 * 規(guī)格: 20mg
杜克雷嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格腸道菌增菌肉湯(E E) 規(guī)格: 250g 用途: 用于腸道菌的增菌培養(yǎng)
NEC(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
PC-3M-IE8(人前列腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基DH82(犬巨噬細(xì)胞)
小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞
增殖關(guān)聯(lián)蛋白2G4(PA2G4)重組蛋白 Recombinant Proliferation Associated Protein 2G4 (PA2G4)
玫瑰小雙孢菌 Microbispora rosea金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae
LoVo(人大腸細(xì)胞)蘇云金芽胞桿菌云南亞種 Bacillus thuringiensis subsp. yunnanensis
人白血病阿霉素耐藥株皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum
酚紅煌綠瓊脂 規(guī)格: 250g 用途: 用于腸道菌的弱選擇性分離。
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