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植酸酶測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:植酸酶測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:需氣菌厭氣菌進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Thioglycollate Medium250克用于培養(yǎng)需氧菌、微需氧菌和厭氧菌抗菌素磺胺類敏感試驗(yàn)瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)ASS Agar250克用于磺胺類靈敏度試驗(yàn)(WHO方法)通用培養(yǎng)肉湯進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)AC Broth250克用于常見(jiàn)微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無(wú)菌試驗(yàn)卵黃高鹽瓊脂基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Egg-Yolk Salt Agar Base

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-24
  • 訪  問(wèn)  量:490

詳細(xì)介紹

商品介紹:

測(cè)定意義:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。

測(cè)定原理

植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿、恒溫水浴鍋,超聲溶解器,回旋式振蕩器。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

植酸酶測(cè)試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6939

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

支原體檢測(cè)  

2 ug pUG6.0 pUG6.0 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

225mlGN增菌液均質(zhì)袋 GN Enrichment Broth 10個(gè)/包

2000 U 限制性內(nèi)切ApaI Restriction Endonuclease -20℃保存

250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.2   Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.2   常溫保存

5mL 素 B 硫酸鹽 Polymyxin B Sulfate Solution 4℃避光保存

2 ug pQE-2 pQE-2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

7%NaCl胰胨水  20支

2 ug pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-Puro pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-Puro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

靛基質(zhì)試驗(yàn)用 Indole Test Medium 250g

2 ug pLVUT-tTR-KRAB pLVUT-tTR-KRAB 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

植酸酶測(cè)試盒微量法Staphyloccocus aureus Rosenbach tropina  金菌體蛋白抗體 規(guī)格: 1mlDonkey anti-Gpig IgG whole serum  驢抗豚鼠IgG抗清 規(guī)格: 1ml

Rabbit Anti-Avidin/PE  PE標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1mlPLCG 1/PLC gamma 1  磷酯Cγ1抗體 規(guī)格: 0.2ml

SOD2  超氧化物歧化2抗體 規(guī)格: 0.1ml

ENTHD1/Epsin2B  Epsin2B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Galactosidase alpha  α-半糖苷抗體 規(guī)格: 0.2ml

GPR78  G蛋白偶聯(lián)受體78抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-cdc25A (Ser124)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/APC  APC標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

WNK1  賴缺陷型蛋白激1抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-Ephrin B(Ser300)  磷酸化Ephrin B抗體 規(guī)格: 0.1ml

DDIT4/REDD1  DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml

TGF Beta 1(CT)  轉(zhuǎn)化生因子β1抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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