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簡(jiǎn)要描述:H2S含量測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)1公斤豆蛋白質(zhì)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Soy protein isolate250克BR,90%水解乳蛋白進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Lactalbumin hydrolysate250克BR進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)1公斤
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
H2S含量測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6923 |
商品介紹:
測(cè)定意義: H2S是一種新型氣態(tài)信號(hào)分子,存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì),生理濃度的H2S對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用,并對(duì)自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過(guò)程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。 測(cè)定原理 H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對(duì)苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán),亞甲基藍(lán)在665nm處有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定其吸光值可計(jì)算H2S含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
2 ug pTALETF_v2 (NN) pTALETF_v2 (NN) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
500U 甲酰胺 [fapy]-DNA 糖基化 FPG(Formamidopyrimidine DNA Glycosylase) -20℃保存
2 ug pDG1663 pDG1663 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
EG EG Medium 250g
25g 葡聚糖凝膠 G-50 中顆粒 Sephadex G-50 Medium 室溫保存
50T 小腸結(jié)腸耶爾森菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
l mg Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Glycine Buffer(緩沖液),0.2M,pH2.5 Glycine Buffer,0.2M,pH2.5 常溫保存
5mL MgCl2溶液,25mM,PCR級(jí) MgCl2,PCR Grade -20℃保存
2 ug pLAPSN pLAPSN 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250mL 消化液(無(wú)EDTA) Trypsin Solution -20℃保存
H2S含量測(cè)試盒微量法ARRDC3 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlET-1 內(nèi)皮素-1抗體 規(guī)格: 0.2ml
SNF5 轉(zhuǎn)錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體 規(guī)格: 0.2mlCCR-3 細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-CK18(Ser74) 磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1mlNOS-2/iNOS 氮合成-2抗體(誘導(dǎo)型) 規(guī)格: 0.1ml
MEGF5/Slit3 復(fù)合型表皮生因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlHistone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-ASK1(Ser967) 磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體 規(guī)格: 0.2mlKLK12 激肽釋放12抗體 規(guī)格: 0.1ml
PICK1 蛋白激Cα相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-Acinus(Ser1180) 磷酸化泡Acinus蛋白抗體 0.1ml
CD10/CALLA/Neprilysin CD10抗體 規(guī)格: 0.1mlChloramphenicol 抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlArfaptin 1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
APR3/C2orf28 凋亡相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SGK1 (Ser78) 磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
TTF-1 甲狀核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 規(guī)格: 0.1mlMLC3F/MYL1/3 肌球蛋白輕鏈1/3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) 磷酸化核糖體S6蛋白激β2抗體 規(guī)格: 0.1ml
BPIL1 殺菌通透性增加蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2ml
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