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內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測試盒微量法

簡要描述:內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:新生A進口、國產(chǎn)Novobiocin添加于100ml mEC肉湯和mTSB肉湯中用于0157選擇性增菌2mg/支*5SD-39瓊脂進口、國產(chǎn)SD-39 Agar用于濾膜法大腸桿菌0157的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)250平板計數(shù)瓊脂(PCA)進口、國產(chǎn)Plate Count Agar國際標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)瓊脂,含糖,用于細(xì)菌總數(shù)的測定(SN標(biāo)

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-25
  • 訪  問  量:470

詳細(xì)介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6779

商品介紹:

測定意義:

Cx存在于細(xì)菌、真菌和動物體內(nèi),是纖維素酶系的組份之一,Cx主要作用于非晶態(tài)纖維素和水溶性纖維素衍生物,隨機水解糖苷鍵,將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。

測定原理:

采用3,5-二硝基水楊酸法測定Cx催化羧甲基纖維素鈉降解產(chǎn)生的還原糖的含量。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

25g 疊氮鈉 Sodium Azide 常溫保存

50T 鴨瘟病毒PCR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存

200 mL 分離液1.077 Cell Separation Solution -20℃保存

100mL HEPES Buffer,0.5M,pH8.5   HEPES Buffer,0.5M,pH8.5   常溫保存

100次 免DNA提取PCR試劑盒 Cell Lysate PCR Mix -20℃保存

50T 卡氏肺胞子蟲PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

綠膿菌素測定用假單胞菌瓊脂(PAP)  250g

1瓶 MLTC-1細(xì)胞株 MLTC-1 低溫運輸和保存

乳糖莫能葡萄糖醛酸瓊脂 LMG Agar 250g

5g 牛血清白蛋白 Albumin From Bovine Serum 4℃保存

250mL Tissue Embedding Reagent  Tissue Embedding Reagent  常溫保存

內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測試盒微量法Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlSNTG2/Syntrophin 5  肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體 規(guī)格: 0.2ml

LRRC4B/NGL3  神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-STAT5a(Tyr694)  磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 規(guī)格: 0.1ml

IGF1R/CD221  胰島素樣生因子1受體抗體 規(guī)格: 0.1mlNectin 2/CD112  細(xì)胞粘附分子CD112抗體 規(guī)格: 0.1ml

ANGPTL5  管生成素相關(guān)蛋白5 規(guī)格: 0.2mlEgr1  早期生應(yīng)答蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

BGP/Osteocalcin  骨保護蛋白/骨鈣素抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

TAG1/CNTN2  瞬時表達(dá)軸索糖蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlCXCR5/CD185  細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體 規(guī)格: 0.1ml

Ninein/GSK3B interacting protein  GSK3B相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlAxin 2  軸抑制蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-HSF1(Ser303)  磷酸化熱休克因子1抗體 規(guī)格: 0.2mlPAR-1/Thrombin receptor  蛋白激活受體-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

MCT1  單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Histone H3 (Ser10)  磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1ml

SUGT1  SUGT1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTBX3  轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體 規(guī)格: 0.2ml

EGR3  早期生反應(yīng)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlDVL2  蓬亂蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

G protein beta 3/GNB3  G蛋白β3抗體/核苷酸結(jié)合蛋白β亞基3 規(guī)格: 0.2mlLOXL4  賴氨酰氧化樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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