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簡要描述:苯胺4羥化酶(AH)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:乳糖膽鹽發(fā)酵 進口、國產(chǎn)Lactose Bile Broth用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標準)250乳糖復發(fā)酵 進口、國產(chǎn)Lactose Broth用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標準)250去氧膽酸鹽瓊脂 進口、國產(chǎn)Desoxycholate Lactose Agar用于大腸桿菌固體平板測定
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商品介紹:
測定意義: 細胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。AH在P450酶系中相當于CYP2E1亞型,CYP2E1不僅參與了藥物的代謝,而且還能催化多種前致癌物和前毒物的活化過程。 測定原理: AH催化苯胺羥化后產(chǎn)生的4-氨基酚,進一步轉(zhuǎn)變?yōu)榉?/span>-吲哚復合物,在630nm處有特征吸收峰;通過測定630nm吸光度增加速率,來計算AH活性。 自備儀器及用品: 普通離心機、超速離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、雙蒸水和冰。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
苯胺4羥化酶(AH)測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6787 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
遠藤氏瓊脂 Endo Agar 250g
1瓶 MDA-MB-468細胞株 MDA-MB-468 低溫運輸和保存
西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 Simmons Citrate Agar 250g
5g N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 Acetyl-D-Glucosamine ?20℃保存
250mL TE Buffer,20X,pH7.6 TE Buffer,20X,pH7.6 常溫保存
50mL DEAE交換介質(zhì) DEAE Medium 常溫干燥封袋保存
2 ug pSV-beta-galactosidase pSV-beta-galactosidase 低溫運輸,-20℃保存
100mL RNase-free 鹽酸胍溶液,8M 常溫
2 ug pCSN44 pCSN44 低溫運輸,-20℃保存
動力 250g
10g 羅丹明 B Rhodamine B 室溫干燥保存
苯胺4羥化酶(AH)測試盒微量法CX3CL1 CX3CL1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Gold 膠體金標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.5ml
SH3TC2 脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N抗體 規(guī)格: 0.2ml
RNF187 環(huán)指蛋白187抗體 規(guī)格: 0.2ml
ROCK2 Rho相關(guān)蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
VGLL4 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
EIF2C1/Ago1 真核翻譯起始因子2C1抗體 規(guī)格: 0.2ml
L-enk 亮腦啡肽抗體 規(guī)格: 0.1ml
DCUN1D2 DCN1樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
c-ABL1/2(Tyr393/429) 磷酸化非受體酪激c-Abl抗體 規(guī)格: 0.1ml
EIG121 雌激素誘導基因121蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
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