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簡(jiǎn)要描述:N乙酰βD葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:TBX 培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)TBX Agar用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時(shí),顯蘭色1000ml細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Total Genes Chromogenic Medium 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)菌總數(shù),培養(yǎng)24小時(shí),細(xì)菌顯紅色250gO157顯色培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)O157 Chromogenic Medium用于O1
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商品介紹:
測(cè)定意義: NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,廣泛存在于各種組織、體液和細(xì)胞中,以前列腺和腎近曲小管細(xì)胞內(nèi)含量最高。NAG活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。 測(cè)定原理: NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對(duì)-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過測(cè)定吸光值升高速率來計(jì)算NAG活性。 自備用品: 酶標(biāo)儀/可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
N乙酰βD葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6775 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
10ku S1 核酸 Nuclease,S1 4℃保存
1000mL TAE,50X TAE,50X 常溫保存
8次 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒 Bacterial Surface Protein Isolation Kit -20℃保存
2 ug pST1347-cas9-D10A pST1347-cas9-D10A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50次 一管式病毒DNAout One-Tube Viral DNAOUT 常溫
1瓶 CCC-HSM-2細(xì)胞株 CCC-HSM-2 低溫運(yùn)輸和保存
蠟樣芽孢桿菌顯色培養(yǎng)基(第三代) 1000ml
100mg 多核苷酸化 Polynucleotide Phosphorylase -20℃保存
125mL Phosphate Buffered RIPA,2X Phosphate Buffered RIPA,2X 常溫保存
100mL 超級(jí)培養(yǎng)基 Super LB Medium 4℃保存,其中成分二-20℃保存,有效期一年。
2 ug pOTB7 PPP2R5D pOTB7 PPP2R5D 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
N乙酰βD葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒微量法Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1ml
KIAA1576/VAT1L 囊泡胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
SEI2/SERTAD2 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激SEI2抗體 規(guī)格: 0.2ml
DDB2 DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
RBPJK/RBP-J Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白R(shí)BPJK抗體 0.2ml
CRP C-反應(yīng)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
NXPH1 神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDK2 周期素依賴性激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
TSPAN14 四分子交聯(lián)體14抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml
P-cadherin P-鈣粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml
KIST/UHMK1 絲/蘇蛋白激KIST抗體(激相互作用與白相關(guān)基因) 規(guī)格: 0.2ml
CA III/Carbonic anhydrase 3 碳酸酐3抗體 規(guī)格: 0.2ml
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