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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CSC, 小鼠心肌細胞 人小腸頸部表皮樣癌細胞，Ca Ski細胞 F81(貓腎細胞)甘丙肽(1-13)-神經肽Y(25-36)酰胺(M32)質量規(guī)格：>95%,BRGalanin (1-13)-Neuropeptide Y(25-36), amide (M32)

人導管瘤細胞;UACC812甘丙肽信號關聯(lián)肽（1-41）酰胺；Preprogalanin(65-105)酰胺質量規(guī)格：>95%,BRGalanin Message Associated Peptide (1-41), amide; Preprogalanin(65-105), amide

ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) 胃泌素Ⅰ（1-14），人質量規(guī)格：>95%,BRGastrin I (1-14) (human)

小鼠間充質干細胞-骨髓MMSC-bm胃泌素釋放肽，人質量規(guī)格：>95%,BRGastrin Releasing Peptide,human

CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘氨脫氧膽酸鈉(進分)質量規(guī)格：>97%,進分,Sigma G9910 glycodeoxycholate
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5偶氮胂 I質量規(guī)格：ARArsenazo I

人神經細胞(HN) (10×106 )堿性品紅(生物染色級)質量規(guī)格：BS(生物染色級)Basic Fuchsin

膀胱上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)酸性藍40(>50%,BS)質量規(guī)格：>50%,BSAcid blue 40

人上皮細胞;Ca Ski 大鼠腸巨噬細胞*培養(yǎng)基 100mL酸性品紅6B(>50%,BS)質量規(guī)格：>50%,BSAcid Red 6B

EL4 小鼠瘤細胞B1(>98%,BR)質量規(guī)格：>98%,BRAflatoxin B1 from Aspergillus flavus
Promocell C-28040 Pericyte Growth Medium, 周細胞生長培養(yǎng)基 500ml植物瓊脂容量：RT支

人成纖維細胞;HFF5-羌基-DL-色安醋(+4°C) 5-xy7noxytryptophcn 26-69-9

TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 銀粉容量：500克

F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells馬脾鐵蛋白容量：25克

NW38細胞，人色素瘤細胞 鼠李糖乳桿菌 人神經膠質細胞瘤細胞;U251PVP-360 100g/250g/500g/5kg原裝 Sigma PVP360
視黃醇結合蛋白RBP試劑盒人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;MuM-2B膠原酶I型(sigma)Collagenase, Type1質量規(guī)格：≥125 CDU/mg ,Sigma分裝

CD164 Others Rat 大鼠 CD164 / Endolyn 人細胞裂解液 (陽性對照) 膠原酶II型(sigma)Collagenase, Type2質量規(guī)格：≥125 CDU/mg ,Sigma分裝

胎兒骨髓間質干細胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells膠原酶IV型(sigma)Collagenase, TypeIV質量規(guī)格：≥160 CDU/mg,Sigma分裝

SHG-44細胞，神經膠質瘤細胞 霉 人內皮細胞RNAHLEC miRNA5 μg鉬酸鈉二水(AR) molybdate質量規(guī)格：>99%,AR

SC-1(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2硅酸鎂（高）Magnesium silicate質量規(guī)格：>98%
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。