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簡(jiǎn)要描述:肝脂酶(HL)測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:煌綠瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Brilliant Green Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g XLD瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:XyloseLysineDesoxycholate Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Triple SugarIronAgar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:肝脂酶(HL)測(cè)試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
檢測(cè)方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6646
產(chǎn)品分類:脂肪酸代謝系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面,可促進(jìn)脂蛋白中的向類固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時(shí),血漿中小顆粒可導(dǎo)致LDL水平升高,加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。 測(cè)定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
50T 人線粒體DNA11778位點(diǎn)突變PCR測(cè)定試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
5 mg H-89 . 2HCL(PKA抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Dialysis Tubing Wash Buffer(透析袋洗滌液),5X Dialysis Tubing Wash Buffer,5X 常溫保存
100mL 超級(jí)雜交液A(不含甲酰胺) SuperHyb Solution -20℃保存
2 ug PiggyBac 5’LTR PiggyBac 5’LTR 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100mL Western印跡膜封膜液(尼龍膜) Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
1瓶 Ketr-3細(xì)胞株 Ketr-3 低溫運(yùn)輸和保存
2×YT肉湯 2×YT Broth 250g
100mg 醛縮 Aldolase 4℃保存
100mL TABS Buffer,0.2M,pH9.0 TABS Buffer,0.2M,pH9.0 常溫保存
1 管 1A75枯草桿菌 1A75 Bacillus subtilis Strain -80℃保存
肝脂酶(HL)測(cè)試盒可見分光光度法Rho C RhoC抗體 規(guī)格: 0.1mlBTBD1/HCV NS5A transactivated protein 8 丙肝毒NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat anti-Bovine IgG whole serum 羊抗牛IgG抗清 規(guī)格: 1mlTransglutaminase 轉(zhuǎn)谷1抗體 規(guī)格: 0.1ml
MyoD1/Myf3 肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlCadherin 9 鈣粘附蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml
EP3 前列素E受體3抗體 規(guī)格: 0.1mlCCDC75 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白75抗體 規(guī)格: 0.2ml
SBP1/Selenium Binding Protein 1 結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlCD83/HB15 CD83抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
Tubulin-alpha 微管蛋白α抗體 Tubulin α 規(guī)格: 0.1mlCCDC37 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體 規(guī)格: 0.2ml
FMNL1 成蛋白相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlMFAP1 微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
ESM1 內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子1抗體 規(guī)格: 0.1mlFerritin Light Chain 鐵蛋白輕鏈抗體 規(guī)格: 0.1ml
MMP9 基質(zhì)金屬蛋白9抗體 0.1mlC1orf129 1號(hào)染色體開放閱讀框129抗體 規(guī)格: 0.2ml
CYP11A1/P450SCC 細(xì)胞色素P450 11A1抗體 規(guī)格: 0.1mlCCDC148 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白148抗體 規(guī)格: 0.2ml
ATG8/GABARAPL2 G1氨基丁酸A型受體相似蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlSLC40A1/FPN1 細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體 規(guī)格: 0.1ml
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