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堿性蛋白酶測試盒微量法

簡要描述:堿性蛋白酶測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:抗生素檢定培養(yǎng)基2號(低pH) 英文名稱:Antibiotic Agar NO.2 產(chǎn)品規(guī)格:250g 抗生素檢定培養(yǎng)基3號 英文名稱:Antibiotic Agar NO.3 產(chǎn)品規(guī)格:250g 抗生素檢定培養(yǎng)基4號 英文名稱:Antibiotic Agar NO.4 產(chǎn)品規(guī)格:250g 抗生素檢定培養(yǎng)基7號 英文名稱:Antibiotic Agar N

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-26
  • 訪  問  量:738

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

AKP是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類,屬于絲。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一,廣泛應(yīng)用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。

測定原理:

在堿性條件下,AKP水解酪蛋白生成酪;在堿性條件下,酪還原磷鉬酸生成鎢藍;鎢藍在680nm有特征吸收峰,測定680nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、0.5 mL EP管和蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

堿性蛋白酶測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6627

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細胞樣品的準(zhǔn)備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

250 T 過氧化氫定量分析試劑盒(脂兼容性) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

50mL Manganese Sulfate Solution(硫酸錳溶液),0.5M  Manganese Sulfate Solution,0.5M  常溫保存

100uL 卡拉抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

250ml Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)   Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)   常溫保存

布氏菌選擇性培養(yǎng)基 Brucella Selective Medium 250g

1瓶 PC12細胞株 PC12 低溫運輸和保存

乙基紫疊氮鈉肉湯 Ethyl Violet Aziode Broth 250g

1g CHAPS CHAPS 室溫保存

250mL Zinc-Formalin  Zinc-Formalin  常溫保存

25mL 十二烷基磺酸鈉清除劑 SDS Erasol -20℃保存

2 ug pBBR1-MCS3 pBBR1-MCS3 低溫運輸,-20℃保存

堿性蛋白酶測試盒微量法HSL/LIPE  荷爾蒙敏脂肪抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-NR1D1(Ser55/59)  磷酸化細胞核受體Rev-Erbα抗體 規(guī)格: 0.1ml

BNIP2  Bcl2相互作用蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2  規(guī)格: 0.1ml

EGFL7  類表皮生因子域7抗體 規(guī)格: 0.1mlTransthyretin  轉(zhuǎn)甲狀素蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-c-Raf(Ser259)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1mlWSTF  轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體 規(guī)格: 0.2ml

IGSF11  大腦和睪特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-p90RSK (Thr573)  磷酸化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

RASSF7  RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2mlGCDGP15/SABP  囊性組織液體蛋白15抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)  磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 規(guī)格: 0.1mlADAR1 (N-terminus)  雙鏈RNA苷酸脫氨基抗體(N端) 0.2ml

MIC1/C18orf8  結(jié)腸相關(guān)蛋白MIC1抗體 規(guī)格: 0.2mlDNAJB4/HSP40 homolog  熱休克蛋白家族40抗體 規(guī)格: 0.1ml

PRL1/PTP4A1  肝再生磷酸酯1抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-rat IgG/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

CD158b2  NK細胞抑制性受體2DL3抗體 規(guī)格: 0.2mlKLHL23  Kelch樣蛋白23抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 100ugCK1+5+10+14  高分子量角蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

TRIM32  TRIM32抗體 規(guī)格: 0.1mlFBXO28  FBXO28蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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