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葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒微量法

簡要描述:葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒微量法公司正在出售的產品:麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) 英文名稱:Maconkey Agar Medium 產品規(guī)格:250g 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:Maconkey Agar 產品規(guī)格:250g 氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:Mannitol Salt Agar 產品規(guī)格:250g 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)(2015藥典) 英文名

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:688

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產物,廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的步反應中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其個底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉化形成糖原或淀粉而被儲存起來。

測定原理:

6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PGNADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測定吸光值。

需自備的儀器和用品:

分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!

產品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6621

11.png 

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

革蘭氏陰性菌(G-)選擇性培養(yǎng)基 Gram Negative Bacteria Selective Medium 250g

1瓶 SF9細胞株 SF9 低溫運輸和保存

亞碲酸鹽肉湯培養(yǎng)基基礎 Sodium Tellurite Broth Base 250g

10g 葡聚糖 T-10 Dextran T-10    室溫保存

50T 大腸桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

20次 蛋白質電泳分子量標準(14.4-97.4 KD) Protein Marker -20℃保存

2 ug pYFPlac195 pYFPlac195 低溫運輸,-20℃保存

50次 一管式病毒DNA-RNAout One-Tube Viral DNA-RNAOUT 溶液A 4℃保存,溶液B和溶液C室溫保存

2 ug pET-29a pET-29a 低溫運輸,-20℃保存

BCYE瓊脂基礎 BCYE Agar Base 100g

1瓶 7WD10細胞株 7WD10 低溫運輸和保存

葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒微量法CXCL5  上皮中性粒細胞活化肽78抗體 規(guī)格: 0.1ml

FAM13B1  FAM13B1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

GNA12/G protein alpha 12  鳥苷酸調節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格: 0.1ml

FRMD4A  FRMD4A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

LY-86/MD-1  MD-1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

DUSP2  雙特異性磷酸2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Integrin beta 3/CD61  整合素β3抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-ERK1/2(Thr202/Tyr204)( p44/42 MAPK)   磷酸化絲裂原活化蛋白激1/2抗體 規(guī)格: 0.2ml

HSD17B3  羥類固醇脫17β3抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD54/ICAM-1  細胞間粘附分子-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

CCDC38  卷曲螺旋結構域蛋白38抗體 規(guī)格: 0.2ml

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