儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

IL25 Protein Mouse 重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標簽)天狼猩紅質(zhì)量規(guī)格：BSDirect red 80

人神經(jīng)系統(tǒng)周邊細胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記) MouseDL-苯甘氨酸(>98%，BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCDL-alpha-Phenylglycine

CM-H081人主動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL丁草胺標準溶液(0.100mg/ml)質(zhì)量規(guī)格：0.100mg/mlButachlor solution

IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 丁草胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,95%Butachlor

人成纖維細胞HLF丁草胺標準溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%Butachlor solution
非洲綠猴腎細胞;VERO E6α-促激素α-MSH質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細胞裂解液 (陽性對照) β-淀粉樣蛋白(1-42),人β-Amyloid Peptide (1-42), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

HOS 骨肉瘤[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34)酰胺 (牛)[Nle8’18,Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

NCI-H460 [H460]人大細胞肺癌細胞 NCI-H460 [H460] large cell lung cancer cell 1640+10% FBS[Phe2,Orn8]-催產(chǎn)素[Phe2,Orn8]-Oxytocin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標簽)[Ser4,Ile8]-催產(chǎn)素[Ser4,Ile8]-Oxytocin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三苯洛沙坦(洛沙坦雜質(zhì)H)質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Trityl Losartan (Losartan Impurity H)

軟骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)洛沙坦-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口Losartan-d3

JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國進口Losartan Carboxylic Acid

615小鼠網(wǎng)織細胞性白血病瘤株;L615洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國進口Losartan Carboxaldehyde

SK-LU-1細胞，人低分化肺腺癌細胞 大鼠腎成纖微細胞,NRK-49F細胞 CL-0106HFL1(人肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2MQAE(氯離子熒光探針)質(zhì)量規(guī)格：進分N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide
NZYM培養(yǎng)基NZYM Broth人胰腺腺泡上皮癌;HPAC滅草煙,咪唑煙酸Imazapyr acid質(zhì)量規(guī)格：>98%

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 咪唑煙酸(標準品)Imazapyr acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

RDFs, 大鼠成纖維細胞石膽酸(標準品)Lithocholic Acid質(zhì)量規(guī)格：>97(GC),標準品

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞 [CIP 104786]細胞 293 [HEK-293] (人胚腎細胞)氧嗪酸鉀Potassium Oxonate質(zhì)量規(guī)格：>98%

人T瘤轉基因細胞;Jurkat D,E氧嗪酸鉀(標準品)Potassium Oxonate質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品

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