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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)富馬酸酮替芬質量規(guī)格：>99%,BRKetotifen fumarate

CL-0464USMC(大鼠血管平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2富馬酸酮替芬(標準品)質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Ketotifen fumarate

CD44 Others Human 人 CD44 人細胞裂解液 (陽性對照) 倍他米質量規(guī)格：>98% Betamethasone

人肝內膽管上皮細胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg倍他米（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98% ,標準品Betamethasone

5637(HTB-9)細胞，人膀胱癌細胞 大鼠肝癌細胞(癌細胞接種到肝臟成瘤),Walker-256細胞 MLF, 小鼠成纖維細胞比阿培南質量規(guī)格：度>97%Biapenem
M-NFS-60 (小鼠白血病細胞G-CSF依賴性) 5×106cells/瓶×2 腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2-氨基-6-嘌呤-9-D-核苷水合物2-Amino-6-mercaptopurine-9-D-riboside Hydrate質量規(guī)格：美國進口

人Butt瘤細胞;RAJIS--3-硫代對乙酰氨基酚S-Methyl-3-thioacetaminophen質量規(guī)格：美國進口

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-羥基奈韋拉平2-Hydroxy Nevirapine質量規(guī)格：美國進口

人胎盤滋養(yǎng)層細胞*培養(yǎng)基 100mL3-羥基奈韋拉平3-Hydroxy Nevirapine質量規(guī)格：美國進口

SAC-II C3細胞，小鼠腹水瘤細胞 NRK(大鼠腎細胞) 人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-24-亞硝基磺胺甲惡唑4-Nitroso Sulfamethoxazole質量規(guī)格：美國進口
人成纖維母細胞-HDF-a2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran

CGB5 Others Human 人 CGB5 人細胞裂解液 (陽性對照) 3',6'-二甲氧基熒烷(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)3',6'-Dimethoxyfluoran

家兔骨髓間充質干細胞;2012083MSC1,1'-亞二-2-萘酚(>97.0%(GC))質量規(guī)格：>97.0%(GC)1,1'-Methylenedi-2-naphthol

二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr- 食管癌細胞，TE-11細胞 B82細胞，鼠細胞系2-萘基芐基(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)Benzyl 2-Naphthyl Ether

B16-F10, 小鼠色素瘤高轉移細胞 Mouse5-溴吲哚 質量規(guī)格：>99%5-Bromoindole
UltraSYBR Mixture Low ROXPromocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml纖維素(20000~30000 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質量規(guī)格：粘度20000~30000 mpa.s

少突膠質前體細胞培養(yǎng)基OPCM-prf纖維素(5500-6500 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質量規(guī)格：粘度5500-6500 mpa.s

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 纖維素(40~60 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質量規(guī)格：粘度40~60 mpa.s

Sars結構蛋白表達株;293 001A異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)Isopropyl β-D-thiogalactoside質量規(guī)格：>98%,BR

大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1 膠質母細胞瘤細胞，A172細胞 Tb 1 Lu細胞，蝙蝠肺細胞甘露糖；D-甘露糖D-Mannose質量規(guī)格：>99%,BR
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。