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磷脂酶C(PLC)測試盒微量法

簡要描述:磷脂酶C(PLC)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:瓊脂培養(yǎng)基H 英文名稱:Agar medium H(MacConkey agar) 產(chǎn)品規(guī)格:250g 肉湯培養(yǎng)基I 英文名稱:Broth medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 瓊脂培養(yǎng)基J 英文名稱:Agar medium J (Deoxycholate citrate agar) 產(chǎn)品規(guī)格:250g 瓊脂培養(yǎng)基K 英文名稱:Agar medium

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:748

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

磷脂酶CEC 3.1.4.3)是一種水解甘油磷酸酯C3位點甘油磷酸酯鍵的脂類水解酶,廣泛存在于微生物及動植物的組織和細胞中,在細胞代謝、細胞傳遞、生長發(fā)育等方面具有重要作用。

測定原理

磷脂酶C催化水解NPPC產(chǎn)生對硝基,在410nm處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、微量石英比色皿、恒溫水浴鍋。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

磷脂酶C(PLC)測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6657

11.png

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

0.063µg 腸激(輕鏈) Enterokinase,Light Chain -20℃保存

125mL RNase-Free TE Buffer(無RNase的TE緩沖液),pH7.4   RNase-Free TE Buffer,pH7.4   常溫保存

1 管 M15大腸桿菌 M15 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pBACPAK9 pBACPAK9 低溫運輸,-20℃保存

5次 大提柱式動物RNAout Maxi Column Animal RNAOUT 4℃保存

2 ug pcDNA3-EGFP pcDNA3-EGFP 低溫運輸,-20℃保存

馬鈴薯液體培養(yǎng)基(含) Potato liquid medium 250g

100mg 4- 甲基傘形酮 -β-D- 葡糖苷酸 4-MUG 4℃避光保存

50T 牛流行熱病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

5 mg Di-2-ANEPEQ  Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

磷脂酶C(PLC)測試盒微量法Rabbit Anti-rat IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Kif14 protein  驅(qū)動蛋白家族Member14蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

SLC14A1/RACH1  尿素轉(zhuǎn)運型糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ESRRG/Estrogen Related Receptor gamma  雌激素受體相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Deltex-1  DTX1抗體 規(guī)格: 0.2ml

SCUBE1  新型小板相關(guān)管內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體 規(guī)格: 0.2ml

G protein alpha  G蛋白α抗體 規(guī)格: 0.2ml

Nestin  巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

HER2 receptor  HER2受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Aggrecanase-2/ADAMTS-5  軟骨蛋白聚糖抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Paxillin(Ser83)  磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格: 0.1ml

ABHD15  水解結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體 規(guī)格: 0.2ml



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